程：       :

大腸桿菌大腸菌群測試片（ECC）使用說明

方法編號：5021

1 原理及適用范圍：大腸桿菌（ Escherichia coli ）和大腸菌群（Coliform）都是存在于溫血動物腸道和糞便的細菌，是條件性致病菌，主要造成水體污染，也可能引起食物中毒的發(fā)生。大腸桿菌大腸菌群測試片（E.coli / Coliform Count Plate）是一種預先制備好的一次性培養(yǎng)基產品，可以同時檢測大腸桿菌和大腸菌群，含有大腸菌選擇性培養(yǎng)基、冷水可溶性的吸水凝膠和半乳糖苷酶（GAL）和葡萄糖醛酸酶（GUD）指示劑。大腸桿菌顯藍色，其他大腸菌群顯紅色，藍點加上紅點為總的大腸菌群數。本產品適合于食品及原料中大腸菌群的計數，如消毒牛乳、冷飲和調味品等樣品的檢測，也可用于表面的衛(wèi)生檢測。

2  操作方法

2.1 樣品處理：取樣品 25 mL（g）放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質杯內，制成1:10的樣品勻液，用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL，注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內，振搖后成為1:100的稀釋液。

2.2 接種：一般食品選1～2個稀釋度進行檢測，含菌量少的液體樣品（如飲用純水和礦泉水等）可直接吸取原液進行檢測。將大腸桿菌大腸菌群測試片（BE203）置于平坦實驗臺面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固，zui后用手輕輕地壓一下，每個稀釋度接種兩片。

2.3 培養(yǎng)： 將測試片疊在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內，堆疊片數不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。

3  結果判讀: 培養(yǎng)后大腸桿菌顯藍色，其他大腸菌群顯紅色，藍點加上紅點為總的大腸菌群數。選擇有陽性菌落的zui高稀釋度的測試片進行計數，然后乘以稀釋倍數即為樣品中每毫升（克）含有大腸菌群數。

4  附加說明

4.1我國的食品衛(wèi)生標準大多都以大腸菌群（ Coliform ）作為檢測指標，而歐盟等許多國家則以大腸桿菌（E.coli）作為檢測對象，因此，本產品對于出口食品和航空配餐等企業(yè)具有更廣泛的應用前景。

4.2 如果樣品的酸堿度pH 7.0以下時，應先用滅過菌的堿性溶液（如1mol/LNaOH）調節(jié)到pH7.0-～8.0。

4.3大腸桿菌大腸菌群測試片對純菌的檢測靈敏度可達0.15 cfu/mL。

4.4一般食品對于大腸菌群的要求都比較嚴格，如果測試片上有成片的紅點，或者中央沒有紅點，但邊緣有很多紅點，一定是已經嚴重超標，建議按多不可計來報告