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北京力高泰科技有限公司
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閱讀：20發(fā)布時間：2022-9-9
當我接到這個任務時，既興奮又忐忑......
工程師：王軍
資料整理：子毅
? 機會來了
LI-COR推出這個新型藻類測量系統(tǒng)有段時間了，我也參加了所有的相關培訓，對6800-18的結構、工作原理可以說是了如指掌。
圖1 6800-18 藻類測量系統(tǒng)（點擊了解詳情）
之前我在青藏高原上測量過光合，但那是高等植物。最近正在讀廈門大學焦院士的《研發(fā)海洋負排放技術，支撐國家碳中和需求》一文，了解到水生藻類有很大的固碳潛力，所以很想實測一下。
我們的一位用戶，一直從事藻類光合的研究，聽說LI-COR新推出了這款儀器，非常感興趣。他們也很想看看這種新型的測量方法究竟怎么樣。
我一琢磨，機會來了，趕緊找劉姐談。劉姐爽快的答應了，對我說：“這段時間你也不用出差了，好好鉆研一下6800-18的使用，爭取盡快掌握測量的關鍵技術。"
得令??！
? 新儀器科普
為了讓大家了解我的實驗，先科普一下這款新儀器。
圖2 6800-18 藻類測量系統(tǒng)和藻類懸浮液
藻類光合作用一直不好測。以前的辦法是氧電極，把藻類懸浮液封閉起來，打光后，測量溶液中的光合放氧，其速率代表光合作用的大小。
6800-18可不是這樣。
藻類懸浮液一直處于開放的環(huán)境中，儀器可自動控制CO2濃度，結合上光源和熒光檢測器、控溫組件等等，像什么熒光-光響應曲線啊，熒光-二氧化碳響應曲線啊，都能測。
圖3 6800-18 藻類測量系統(tǒng)工作原理
? 藻類暗適應參數(shù)測量
5月28日 星期五 晴
我把儀器架設好，王老師把實驗藻類遞給我說：“你先測量一下野生型和突變體的暗適應熒光參數(shù)吧"。我說，“好嘞"。
看著這兩個錐形瓶中淺綠色的樣品，我突然想起了LI-COR的應用科學家Jason。Jason也是在這樣一個類似的實驗室，實測了藻類的光合作用。
眼前是熟悉的實驗室場景：瓶瓶罐罐、通風櫥、黑色實驗臺。我心里暗想：“這藻類和高等植物的熒光能有多大差別呢？"
個實驗，我打算先測量一下潛在光化學量子效率Fv/Fm。對高等植物來說，這個參數(shù)反映了植物的受脅迫程度，在沒有受到脅迫的情況下，大約是0.75-0.85的樣子，受脅迫越嚴重，該值下降的越厲害。
我將LI-6800架設好，在軟件上做了相應的設置：
CO2R濃度控制400ppm
Flow控制為500μmol/s
風扇14000 rpm
溫度未做控制
光照關閉
我用洗瓶中的蒸餾水，把藻類測量室沖洗了3遍。取來錐形瓶，放入0.5mg碳酸酐酶，之后用移液槍吸取了15ml藻類懸浮液（野生型）與其混合，混合后取其中13.5ml用于測量。這一實驗還可同步測量藻類的暗呼吸速率Rdark 。
圖4 清洗6800-18藻類測量室
使用Rectangular Flash測量暗適應下熒光信號值Fm。Rectangular Flash持續(xù)時間設置為500ms，測量光調制頻率Dark mod rate設置為10 Hz。
暗適應接近40min了，數(shù)據(jù)也穩(wěn)定了。二話不說，打飽和閃光，記錄熒光數(shù)據(jù)Fv/Fm和暗呼吸速率Rdark。最終，暗呼吸速率Rdark 大約為-0.0016μmol/s，F(xiàn)v/Fm 大約為0.67。
下午測量的是衣藻突變體，實驗設置和上午保持一致，等了大約40min，暗呼吸速率Rdark 一直在-0.0034μmol/s附近波動。數(shù)據(jù)穩(wěn)定，記錄數(shù)據(jù)。暗呼吸速率Rdark 大約為-0.0034，F(xiàn)v/Fm大約為0.18。
圖5 衣藻突變體暗呼吸速率數(shù)據(jù)
我把這些數(shù)據(jù)拿給王老師看。王老師說：“看起來還不錯哦，你上午測量的是野生型，下午測量是突變體。我們之前也使用其他方法測量過，取得的數(shù)據(jù)類似。接下來，你能不能給我們測量一下它們的熒光-光響應曲線？"我愉快的回應：“沒問題，咱們試試吧"。
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