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土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC）試劑盒說明書
For Research Use Only
僅供研究用
貨號：QYS-235096
分光光度法 50 管/24 樣

土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC）試劑盒說明書測定意義：

S-SC 能夠水解蔗糖變成相應(yīng)的單糖而被機(jī)體吸收，其酶促作用產(chǎn)物與土壤中有機(jī)質(zhì)、氮、磷含量，微生物數(shù)量及土壤呼吸強(qiáng)度密切關(guān)，是評價土壤肥力的重要指標(biāo)。
測定原理：

S-SC 催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖，進(jìn)一步與 3，5－二硝基水楊酸反應(yīng)，生成棕紅色氨基化合物，在 510nm 有特征光吸收，在一定范圍內(nèi) 510nm 光吸收增加速率與 S-SC 活性成正比。
自備用品：

可見分光光度計、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：甲苯 5mL×1 瓶，4℃保存；（自備）
試劑二：液體 15mL×1 瓶，4℃保存；
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存；臨用前每瓶加入 40mL 蒸餾水充分溶解備用；用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體 30mL×1 瓶，4℃保存。
土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC）試劑盒說明書測定步驟和加樣表：

試劑名稱    測定管        對照管
                    
風(fēng)干土樣（g）    0.1            0.1
試劑一（μL）    15            15
振蕩混勻，使土樣全部濕潤，37℃水浴 15min    
試劑二（μL）        250            250
試劑三（μL）        750            
蒸餾水（μL）                    750
                    

充分混勻，放入 37℃水浴培養(yǎng) 24 小時，10000 g，4℃，離心 5min，取上清液

上清液（μL）    200    200
試劑四（μL）    500    500

充分混勻，放入沸水浴中煮沸 5min（蓋緊，以防止水分散失），流水冷卻后充分混勻，蒸餾水稀釋 10 倍后（可以吸取 100μL，加入 900μL 蒸餾水稀釋；如果吸光度大于 4，可以適當(dāng)加大稀釋倍數(shù)），510nm 處蒸餾水調(diào)零，讀吸光值 A。計算 ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管需設(shè)一個對照管。

S-SC 活性計算：

標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為 y = 4.9x -0.062；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y 為吸光值。單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1mg 還原糖定義為一個 S-SC 活力單位。
S-SC 活力(U /g 土樣)=( ΔA+0.062) ÷4.9×10×V 反總÷W÷T =20.7×(ΔA+0.062) 10：稀釋倍數(shù)；T：反應(yīng)時間，1d； V 反總：反應(yīng)體系總體積：1.015mL；W：樣本質(zhì)量，